本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：黑龍江立克次體PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品貨號：FS-P63564
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運輸及保存
低溫運輸，-20℃保存，保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX（根據(jù)機型決定，具體見使用方法）。
產(chǎn)品及特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設(shè)計的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
使用方法：
一、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記6個離心管，分別為7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品，必須設(shè)置N+2個提取，多出的一個是PC（樣品制備陽性對照），一個是NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系，在樣品制備室進行）
10. 如果只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+9個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照，6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù)，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）
實驗過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
CDK4（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：100微克
細(xì)胞熒光顯微鏡直接檢測試劑盒（含熒光一抗） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：10次
5-氟乳清酸水合物 5-Fluoroorotic acid hydrate 207291-81-4 質(zhì)量規(guī)格：美國進口
PDGFR-beta（抗人；抗兔；抗小鼠；抗大鼠） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：100微克
BOC-D-丙氨酸 Boc-D-Ala-OH 7764-95-6 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR
氨基黑10B Amido black 10B 1064-48-8 質(zhì)量規(guī)格：AR
SEA-0400 SEA0400 223104-29-8 質(zhì)量規(guī)格：>98%,鈉離子-鈣離子交換子（NCX）抑制劑
冰凍切片組織CASPASE-5蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次
去甲基鹽酸左氧氟沙星 Desmethyl Levofloxacin Hydrochloride 117707-40-1 質(zhì)量規(guī)格：美國進口
間氟-DL-酪氨酸 m-Fluoro-DL-tyrosine 403-90-7 質(zhì)量規(guī)格：0.99
細(xì)胞蛋白表達(dá)比色法定量檢測試劑盒-LEPTIN 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/50 次
石蠟切片組織DHPR受體蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次
別隱品堿;A-別隱品堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Allocryptopine 485-91-6 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
脘蛋白糖基化分型（glycoform）試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：5次
腺嘌呤核苷（腺苷）（標(biāo)準(zhǔn)品） Adenosine 58-61-7 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
APC蛋白標(biāo)記試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：1次（1毫克/次）
黑龍江立克次體PCR檢測試劑盒李氏增肉湯（LB1,LB2）基礎(chǔ)顆粒 英文名稱：Listeria Enrichment Broth Base 產(chǎn)品規(guī)格：225ml/袋*10 產(chǎn)品用途：用于李氏的二步增（GB）用途:添加萘啶酮酸，黃素即為 LB1,LB2，用于李斯特氏二步增成分(g/L)胰胨 5.0多價胨 5.0酵母膏 5.0氯鈉 20.0磷酸氫二鈉 12.0磷酸二氫鉀 1.4七葉苷 1.0pH值7.3 ± 0.1 25℃
乳糖蛋白胨培養(yǎng)液顆粒 英文名稱：Lactose Peptone Broth 產(chǎn)品規(guī)格：300ml/袋*10 產(chǎn)品用途：用于飲用水，水源水中總大腸群的測定(GB標(biāo)準(zhǔn))用途用于飲用水，水源水中總大腸群的測定成分（g/L）蛋白胨 10.0g牛肉浸膏 3.0g乳糖 5.0g氯鈉 5.0g溴紫 0.016gPH值 7.3-7.5※請放置陰涼干燥處保存
LB肉湯顆粒 英文名稱：LB Broth 產(chǎn)品規(guī)格：300ml/袋*10 產(chǎn)品用途：用于基因工程大腸桿培養(yǎng)用途用于細(xì)增培養(yǎng)。成分（g/L）蛋白胨 10.0g酵母粉 5.0g氯鈉 10.0gPH值 7.0±0.1
改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基顆粒 英文名稱：Martin Agar Medium, Modified 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于藥品及生物制品霉無檢驗用途:用于生物制品霉無試驗。成分(g/L)蛋白胨 5.0磷酸氫二鉀 1.0硫酸鎂 0.5酵母浸出粉 2.0葡萄糖 20.0瓊脂 14.0pH值6.4 ± 0.2 25℃用法稱取本品 42.5g,加熱攪拌溶解于 1000ml 純化水中,分裝,115℃高壓滅 20 分鐘,備用。
胰蛋白胨大豆肉湯顆粒 英文名稱：Tryptose Soya Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于金黃色葡萄球的MPN測定，增培養(yǎng)用途:一種通用的營養(yǎng)培養(yǎng)基,用于多種微生物的增培養(yǎng)。成分(g/L)Pancreatic digest of casein/胰酶水解的酪素 17.0Papaic digest of soya bean/胃酶水解的大豆 3.0Sodium choride/ 氯鈉 5.0Dipotassium hydrogen phosphate /磷酸氫二鉀 2.5Glucose monohydrate/一水葡萄糖 2.5pH值7.3 ± 0.2 25℃用法Suspend 30g/liter, autoclave 15 min at 121℃). 稱取本品 30.0g,加熱溶解于 1000ml 純化水中,分裝,121℃ 高壓滅 15 分鐘,備用。
胰蛋白胨大豆瓊脂顆粒 英文名稱：TSA Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：一種通用的營養(yǎng)培養(yǎng)基，用于各種微生物的培養(yǎng)用途一種通用的營養(yǎng)培養(yǎng)基，用于各種微生物的培養(yǎng)。成分（g/L）胰蛋白胨 15.0g大豆胨 5.0g氯鈉 5.0g瓊脂 15.0gPH值 7.3±0.2用 法稱取本品40克, 加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中，121℃高壓滅15分鐘備用。
腦心浸出液肉湯（BHI）顆粒 英文名稱：BHI Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于細(xì)的增培養(yǎng)或純化培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))用途:營養(yǎng)豐富,用于培養(yǎng)各種細(xì)。成分(g/L)胰蛋白胨 10.0牛心浸粉 17.5氯鈉 5.0葡萄糖 2.0磷酸氫二鈉(12H2O) 2.5pH值7.4 ± 0.2 25℃用法稱取本品 38.5g,加熱攪拌溶解于 1000ml 蒸餾水中,121℃高壓滅 15 分鐘,備用。
大豆酪蛋白消化物培養(yǎng)基（USP）顆粒 英文名稱：Soybean Casein Digest Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于藥品的無檢測產(chǎn)品用法：稱取本品30克,溶于1000ml蒸餾水中，分裝于試管中，121℃高壓滅15分鐘備用。
10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯顆粒 英文名稱：10% NaCl Trypticase Soy Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于金黃色葡萄球增培養(yǎng)用途:用于金黃色葡萄球增培養(yǎng)。成分(g/L)胰蛋白胨 17.0大豆蛋白胨 3.0氯鈉 100.0磷酸氫二鉀 2.5酸鈉 10.0葡萄糖 2.5pH值7.3 ± 0.2 25℃用法稱取本品 135.0g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝,每瓶 225ml,121℃高壓滅 15 分鐘,備用。
麥康凱液體培養(yǎng)基（顆粒） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于大腸埃希選擇性增培養(yǎng)用途：用于大腸埃希氏選擇性增培養(yǎng)成分：明膠胰酶水解物 20.0乳糖 10.0牛膽鹽 5.0溴藍(lán) 0.01pH值7.3±0.2 25℃用法：稱取本品35.0g，加熱攪拌溶解于1000ml純化水中，分裝，121℃高壓滅15分鐘，備用。