本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：漢灘病毒PCR檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-P63610
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX（根據(jù)機(jī)型決定，具體見(jiàn)使用方法）。

產(chǎn)品及特點(diǎn)：
1. 即開(kāi)即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物，與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè)，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

使用方法：
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管，分別為7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品，必須設(shè)置N+2個(gè)提取，多出的一個(gè)是PC（樣品制備陽(yáng)性對(duì)照），一個(gè)是NC（樣品制備陰性對(duì)照）。可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝）或第5號(hào)（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系，在樣品制備室進(jìn)行）
10. 如果只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品，1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照，6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù)，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照，并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加）
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

NAD;氧化型輔酶I;β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸水合物 β-Nicotinamide adenine dinucleotide hydrate(β-NAD) 53-84-9 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

蛋白酶3底物1m，熒光 Caspase 3 Substrate 1m(Apopain), fluorogenic; Ac-DEVD-AMC 169322-61-0 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

細(xì)胞SGK1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C） 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：20次

N-乙酰-DL-亮氨酸 N-Acetyl-DL-leucine  99-15-0 質(zhì)量規(guī)格：0.98

五味子酚（標(biāo)準(zhǔn)品） schisanhenol   69363-14-0 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

組織白細(xì)胞介素-1β轉(zhuǎn)換酶（ICE）活性熒光淬滅法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：20次

膽堿酯酶（CHE）定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：50次

利福霉素鈉；利福霉素SV鈉 Rifamycin sodium salt 14897-39-3 質(zhì)量規(guī)格：>900IU/mg ,BR

6-O-去甲多奈哌齊 6-O-Desmethyl Donepezil 120013-56-1 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

真/酵母蛋白巰基/結(jié)合巰基含量比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：20次

冰凍切片細(xì)胞色素C氧化酶活性染色試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：50次

十八烷醇,1-十八醇(標(biāo)準(zhǔn)品) 1-Octadecanol 112-92-5 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

動(dòng)物組織冰凍切片糖蛋白高希爾（PAS）法阿爾新藍(lán)（ALCIAN BLUE）染色試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：50次

乳果糖（標(biāo)準(zhǔn)品） Lactulose 4618-18-2 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

細(xì)胞色素P450亞酶CYP3A1（BROD）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格：20次

4-磺酰杯[4]芳烴水合物(>94.0%(T)) 4-Sulfocalix[4]arene Hydrate 112269-92-8 質(zhì)量規(guī)格：>94.0%(T)

漢灘病毒PCR檢測(cè)試劑盒EEM培養(yǎng)基 英文名稱：EEM medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于致病性大腸桿的增培養(yǎng)和腸桿的增培養(yǎng)產(chǎn)品用法： 稱取本品 43.5g ,溶解于 1000ml蒸餾水中,分裝試管,經(jīng) 100℃流動(dòng)蒸汽滅 30 分鐘,備用。無(wú)需高壓滅。產(chǎn)品用途：用于致病性大腸桿的增培養(yǎng)和腸桿的增培養(yǎng)

胰蛋白胨膽鹽瓊脂 英文名稱：Tryptone Bile Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于大腸桿的膜過(guò)濾法選擇性培養(yǎng)(ISO標(biāo)準(zhǔn))用途:濾膜法快速檢測(cè)水中大腸桿和大腸群用法稱取本品 36.5g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅 15 分鐘,備用

Elek氏培養(yǎng)基 英文名稱：Elek Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于致瀉大腸埃希氏的產(chǎn)毒培養(yǎng)用途:用于致瀉大腸埃希氏的測(cè)定。成分(g/L)蛋白胨 20.0麥芽糖 3.0乳糖 0.7氯鈉 5.0瓊脂 14.0pH值7.8 ± 0.1 25℃用法稱取本品 43.7g,加入 1000ml蒸餾水中,121℃高壓滅 15分鐘,備用。

大腸群快檢紙片(水源水) 英文名稱：Coliform bacteria detective plate 產(chǎn)品規(guī)格：5份/包 產(chǎn)品用途：用于水質(zhì)檢驗(yàn)主要用于水質(zhì)檢驗(yàn)，方便、快捷、迅速！在2-8℃冰箱保存，鋁箔袋打開(kāi)后，未用的測(cè)試紙片要放回袋中重新封好，放到冰箱中，一個(gè)月內(nèi)用完。

MFC肉湯 英文名稱：MFC Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于大腸群的濾膜法檢測(cè)MFC肉湯是公司改良的培養(yǎng)基，用于大腸群的濾膜法檢測(cè)。

MFC瓊脂 英文名稱：MFC Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于大腸群的濾膜法檢測(cè)用途用于生活飲用水及其水源水中糞大腸群測(cè)定。成分（g/L）多價(jià)蛋白胨 5.0g胰蛋白胨 10.0g乳糖 12.5g酵母粉 3.0g三號(hào)膽鹽 1.5g氯鈉 5.0g藍(lán) 0.1g瓊脂 15.0gPH值 7.4±0.2用 法稱取本品52.3克，加熱煮沸溶解于1000ml蒸餾水中,冷卻至45-50℃時(shí)，傾入無(wú)平皿。無(wú)需高壓滅。

煌綠乳糖膽鹽肉湯（BGLB） 英文名稱：Brilliant Green Lactose Bile Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于大腸群、大腸桿的測(cè)定(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))用途:用于大腸群的確證試驗(yàn)。成分(g/L)蛋白胨 10.0乳糖 10.0牛膽粉 20.0煌綠 0.0133pH值 7.2±0.1 25℃用法稱取本品40.0g,加熱攪拌溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝到有倒立發(fā)酵管的20mm*150mm 試管中,每管 10ml,121℃高壓滅 15 分鐘,備用。

Voges-Proskauer(V-P)試劑 英文名稱：V-P Box 產(chǎn)品規(guī)格：5ml*4 產(chǎn)品用途：用于V-P試驗(yàn)V-P試劑是Voges-Proskauer試劑的簡(jiǎn)稱，用于V-P試驗(yàn)。1、成分甲液α-萘酚 5.0g無(wú)水乙醇 100.0ml乙液氫鉀 40.0g用蒸餾水加至1000ml2、試驗(yàn)方法將3%氯鈉胰蛋白胨大豆瓊脂生長(zhǎng)物接種3%氯鈉MR-VP培養(yǎng)基，36℃士1℃培養(yǎng)48h。取1ml培養(yǎng)物轉(zhuǎn)放到一個(gè)試管內(nèi)，加0.6ml甲液，搖動(dòng)。加0.2ml乙液，搖動(dòng)。隨意加一點(diǎn)肌酸結(jié)晶，4h后觀察結(jié)果。陽(yáng)性結(jié)果是呈伊紅的粉紅色。

pH7.3PBS緩沖液 英文名稱：PBS 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：PBS是Tris-HCl緩沖鹽溶液PBS是Tris-HCl緩沖鹽溶液，為等滲鹽溶液加Tris-HCl緩沖液

MEE肉湯 英文名稱：MEE Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于腸道的選擇性增培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))用途:用于腸桿選擇性增培養(yǎng)。成分(g/L)蛋白胨 10.0葡萄糖 5.0磷酸氫二鈉 6.45磷酸二氫鉀 2.0三號(hào)膽鹽 10.0煌綠 0.015pH值7.2 ± 0.2 25℃用法稱取本品 33.5g,加熱攪拌溶解于 1000ml 蒸餾水中,于沸水中加熱 30 分鐘,迅速冷卻培養(yǎng)基分裝于17mm × 170mm 試管中,每管 10ml ,無(wú)需高壓滅,0 - 5℃可存放一周。