實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

產品及特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據保守序列設計的專一性引物，與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
參數規(guī)格：
產品名稱：漢灘病毒和漢城病毒PCR檢測試劑盒
產品規(guī)格：50T
產品貨號：FS-P63612
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年
產品特點：本產品就是根據保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產品。
運輸及保存
低溫運輸，-20℃保存，保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX（根據機型決定，具體見使用方法）。

實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法：
一、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管，分別為7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品，必須設置N+2個提取，多出的一個是PC（樣品制備陽性對照），一個是NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設置qPCR反應（20 μL體系，在樣品制備室進行）
10. 如果只做1次重復，則標記N+9個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照，6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復，則反應設置數量相應增加2或3倍。
11. 產品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）

轉基因玉米MON802品系基因檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：20次

卡洛芬乙酯 (卡洛芬雜質) Carprofen Ethyl Ester (Carprofen Impurity) 52262-89-2 質量規(guī)格：美國進口

鈷試劑(1-亞硝基-2-萘酚) 1-Nitroso-2-Naphthol 131-91-9 質量規(guī)格：AR

甲基綠復染試劑盒 進口/國產 規(guī)格：50次

豆甾醇（標準品） Stigmasterol 83-48-7 質量規(guī)格：95%,標準品,大豆來源

丁二酸銨(>98%,BR) Ammonium succinate 2226-88-2 質量規(guī)格：>98%,BR

 細胞GSK-3BETA蛋白表達熒光定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：10/50 次

糖果檸檬酸比色法定量檢測試劑盒  進口/國產 規(guī)格：20次

組織磷酸甲戊二羥酸激酶（phosphomevalonate kinase）活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：20次

細胞培養(yǎng)污染性支原體M.hominis鑒定16S rDNAPCR擴增檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：20次

舒林酸（標準品） Sulindac 38194-50-2 質量規(guī)格：檢查

活體細胞線粒體膜通道孔（MPTP）熒光檢測試劑盒 進口/國產 規(guī)格：20次

羧芐青霉素鈉/羧芐西林鈉 Carbenicillin disodium 4800-94-6 質量規(guī)格：>90%,BR

酵母細胞甲磺酸乙脂誘導突變試劑盒 進口/國產 規(guī)格：10次

2-羥甲基奧氮平 2-Hydroxymethyl Olanzapine 174756-45-7 質量規(guī)格：美國進口

ADA單鈉鹽 ADA monosodium salt 7415-22-7 質量規(guī)格：>99%

漢灘病毒和漢城病毒PCR檢測試劑盒去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽乳糖蔗糖瓊脂 英文名稱：DCLS Agar 產品規(guī)格：250g 產品用途：用于致病性腸桿的分離培養(yǎng)。去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽乳糖蔗糖瓊脂用于致病性腸桿的分離培養(yǎng)。

Honda氏產毒肉湯 英文名稱：Honda Toxin-Producing Broth 產品規(guī)格：250g 產品用途：用于致瀉大腸埃希氏的產毒培養(yǎng)用途:用于致瀉大腸埃希氏產毒培養(yǎng)。成分(g/L)酪蛋白胨 20.0酵母浸粉 10.0氯鈉 2.5磷酸氫二鉀 15.0葡萄糖 5.0硫酸鎂 0.025氯鐵 0.0025氯鈷 0.01pH值7.5±0.1 25℃用法稱取本品 52.54g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,121℃高壓滅 15 分鐘,待冷至45-50℃左右時,加入過濾除的林可霉素溶液,每毫升培養(yǎng)基內含 90ug,混勻,備用。

PSB（磷酸鹽緩沖液pH7.2） 英文名稱： 產品規(guī)格：9ml*20支/包 產品用途：用于樣品的稀釋產品用途：用于樣品的稀釋

ModifiedSclohtens'Broth(MSB) 英文名稱：Modified Sclohtens' Broth 產品規(guī)格：250g 產品用途：用于陰溝腸桿的培養(yǎng)用途:用于陰溝腸桿增培養(yǎng)。用法稱取品本 31.0g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅 15 分鐘,備用。

葡萄糖肉湯 英文名稱：Dextrose Broth 產品規(guī)格：250g 產品用途：用于營養(yǎng)苛求培養(yǎng)和腸道產氣實驗用途:用于營養(yǎng)苛求培養(yǎng)或腸道產氣試驗。成分(g/L)蛋白胨 10.0牛肉膏 5.0氯鈉 5.0葡萄糖 10.0pH值7.2 - 7.4 25℃用法稱取本品 30.0g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅 15 分鐘,備用。

小肉湯培養(yǎng)基 英文名稱：the Smallest Broth Medium 產品規(guī)格：250g 產品用途：用法稱取本品 4.14g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,過濾除或 121℃高壓滅 15 分鐘,備用。

HB-PET自誘導培養(yǎng)基 英文名稱：HB-PET Auto-Indection Medium 產品規(guī)格：250g 產品用途：用于基因工程大腸桿自誘導蛋白表達培養(yǎng)用途:用于基因工程大腸桿自誘導蛋白表達培養(yǎng)。用法稱取本品 27.5g,另取甘油 5g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅 15分鐘,冷卻,臨用前加入卡那霉素(終濃度為 100ug/ml)。

m-遠藤氏培養(yǎng)基 英文名稱：M-Endo Medium 產品規(guī)格：250g 產品用途：用于濾膜法檢測水中大腸群用途:用于濾膜法檢測水中大腸群。用法稱取本品 48.0g,加入 20ml無水乙醇和 980ml 蒸餾水中,加熱溶解。注:無需高壓滅。

CAYE培養(yǎng)基 英文名稱：CAYE Medium 產品規(guī)格：250g 產品用途：用于致病性大腸埃希氏產毒培養(yǎng)用途:用于致病性大腸埃希氏產毒培養(yǎng)。用法稱取本品 7.95g,加熱溶解于 200ml 蒸餾水中,分裝試管,每管 0.6ml,121℃高壓滅 15 分鐘,備用。注:37℃振蕩培養(yǎng)過夜后,每管中加入 20000IU/ml的多粘素B 0.05ml。

接種測試微生物瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱：Medium Ⅱ(for Transferring the Test Organism) 產品規(guī)格：250g 產品用途：用于效價測定用途:用于效價測定。用法稱取本品 30.5g,加熱溶解于 1000ml 純化水中,分裝,121℃高壓滅 15 分鐘,備用。