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產(chǎn)品名稱：TJP1緊密連接蛋白1檢測試劑盒
英文名稱：Tight Junction Protein 1(TJP1)ELISA Kit

貨號：A102338

規(guī)格：96T/48T 

保存；2-8℃。

檢測目的：用于檢測血漿，血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本.

檢測種屬：大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動植物。

實驗流程:

1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備；

2. 加樣（標準品及樣本）100μL，37°C孵育1小時；

3. 吸棄，加檢測溶液A100μL，37°C孵育1小時；

4. 洗板3次；

5. 加檢測溶液B100μL，37°C孵育30分鐘；

6. 洗板5次；

7. 加TMB底物90μL，37°C孵育10-20分鐘；

8. 加終止液50μL，立即450nm讀數(shù)。

試劑和樣本的控制方法：

一、試劑

1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān)，我司嚴格按照國家標準進行生產(chǎn)，已獲得國家承認的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的生產(chǎn)批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。

2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。

二、樣本

1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；

類風(fēng)濕因子的控制方法：

①用F(ab)2替代完整的IgG；

②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；

③檢測抗原時，可用2-巰基乙醇加入到標本稀釋液中使RF降解。

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

注意事項:

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間zui好控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4．  如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。

5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準

大鼠主動脈平滑肌細胞大鼠胎兒真皮成纖維細胞完全培養(yǎng)基 ELISA Kit for Human Thioredoxin reductase 1, cytoplasmic大鼠甘丙肽(GAL)ELISA試劑盒，英文名：GAL ELISA Kit

異常漢遜酵母 Hansenula anomala釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae　　ELISA Kit for Human Vascular endothelial growth factor C大鼠白介素7(IL7)ELISA試劑盒，英文名：IL7 ELISA Kit

大豆慢生根瘤 Bradyrhizobium japonicum中慢生華癸根瘤 Mesorhizobium huakuii　　大鼠Ⅰ型膠原α1(COL1α1)ELISA試劑盒，英文名：COL1α1 ELISA Kit

CHO-K1(倉鼠卵巢細胞亞株)Mammalian Protein Extraction Reagent/哺動物蛋白抽提試劑　　人半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素A(Cys-A)ELISA試劑盒人96T0.469-30 ng/mL小鼠3-硝基酪氨酸(3-NT)ELISA試劑盒，英文名：3-NT ELISA Kit

豬霍亂沙門氏 Salmonella cholerae-suis嗜熱鏈球 Streptococcus thermophilus　　ELISA Kit for Dehydroepiandrosterone小鼠組織因子(TF)ELISA試劑盒，英文名：TF ELISA Kit

鏈霉 Streptomyces sp.佛羅里達側(cè)耳 Pleurotus florida　　人橋粒芯糖蛋白2(DSG2)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/ml小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP1)ELISA試劑盒，英文名：GLP1 ELISA Kit

E.G7-OVA(小鼠T瘤細胞)小鼠肺細胞　　ELISA Kit for Human Alpha-enolase小鼠細胞分裂周期因子25(CDC25)ELISA試劑盒，英文名：CDC25 ELISA Kit

泡盛曲霉變種 Aspergillus awamori var.角膜上皮細胞完全培養(yǎng)基　　人延胡索酸酶/延胡索酸水合酶(FH)ELISA試劑盒人96T78-5000 ng/mL小鼠腎上腺素能受體β2(ADRβ2)ELISA試劑盒，英文名：ADRβ2 ELISA Kit

抗生鏈霉 Streptomyces antibioticus熒光假單胞 Pseudomonas fluorescens　　ELISA Kit for Human Fibrinogen gamma chain小鼠凝血酶/抗凝血酶復(fù)合體(TAT)ELISA試劑盒，英文名：TAT ELISA Kit

X光膠片厚垣孢普可尼亞 Pochonia chlamydosporia　　人顆粒溶素(Granulysin)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠角蛋白9(KRT9)ELISA試劑盒，英文名：KRT9 ELISA Kit

TJP1緊密連接蛋白1檢測試劑盒BOC-N-β-Trityl-L-天門冬酰胺 英文: Boc-Asn(Trt)-OH CAS號: 132388-68-2  

BOC-O-芐基-L-酪氨酸 英文: Boc-Tyr(Bzl)-OH CAS號: 2130-96-3  

BOC-S-Trityl-L-半胱氨酸 英文: N-Boc-S-Trityl-L-cysteine CAS號: 21947-98-8  

BOC-硝基-L-精氨酸 英文: Boc-Arg(NO2)-OH CAS號: 2188-18-3  

BOD1  雙向染色體細胞分裂蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

BOK/Bcl 2 like protein 9  Bcl2樣凋亡蛋白9抗體 規(guī)格: 0.2ml

BOLA1  BOLA1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

BOLA2  BOLA2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlASP/AKAP associated Sperm Protein  子相關(guān)蛋白AKAP抗體 規(guī)格: 0.2ml

Bone Alkaline Phosphatase/AKP2  骨堿性磷酸酶抗體 規(guī)格: 0.2ml

Bone sialoprotein  骨涎蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlDGAT1/Diglyceride acyltransferase  二脂酰甘油?；D(zhuǎn)移酶抗體 規(guī)格: 0.2ml

操作流程：

（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 

（2）酶標板置4℃，包被過夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 

（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 

（6）洗板，同（4）。 

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 

（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 

（9）洗板，同（4）。 

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 

（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。