操作流程：

（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 

（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 

（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 

（6）洗板，同（4）。 

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 

（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 

（9）洗板，同（4）。 

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 

（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。

服務(wù)：所有的檢測(cè)試劑盒均免費(fèi)代測(cè)，您只需要將您準(zhǔn)備好的樣本郵寄到我司即可！本地也可以上門(mén)收取樣本！全程檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)，免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn)。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。老客戶可享受優(yōu)惠折扣服務(wù)！

產(chǎn)品名稱(chēng)：ADAM33解整合素金屬蛋白酶33檢測(cè)試劑盒
英文名稱(chēng)：A Disintegrin And Metalloprotease 33(ADAM33)ELISA Kit

貨號(hào)：A102354

規(guī)格：96T/48T 

保存；2-8℃。

檢測(cè)目的：用于檢測(cè)血漿，血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本.

檢測(cè)種屬：大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚(yú)、人、等動(dòng)植物。

實(shí)驗(yàn)流程:

1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；

2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100μL，37°C孵育1小時(shí)；

3. 吸棄，加檢測(cè)溶液A100μL，37°C孵育1小時(shí)；

4. 洗板3次；

5. 加檢測(cè)溶液B100μL，37°C孵育30分鐘；

6. 洗板5次；

7. 加TMB底物90μL，37°C孵育10-20分鐘；

8. 加終止液50μL，立即450nm讀數(shù)。

試劑和樣本的控制方法：

一、試劑

1.試劑的選擇：國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證”，每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的生產(chǎn)批號(hào)，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會(huì)有過(guò)期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。

2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái)，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測(cè)定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測(cè)定需求。

二、樣本

1.內(nèi)源性干擾因素：包括類(lèi)風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；

類(lèi)風(fēng)濕因子的控制方法：

①用F(ab)2替代完整的IgG；

②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；

③檢測(cè)抗原時(shí)，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。

檢測(cè)程序：

1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。

注意事項(xiàng):

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zui好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4．  如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。

5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。顯色劑B請(qǐng)避光保存。

7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)

葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum戊糖片球 Pediococcus pentosaceus　　人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)ELISA試劑盒，英文名：VEGF-B ELISA Kit

大腸桿 Escherichia coli毛柄**(金針菇) Flammulina velutipes　　人甘露糖受體1(MRC1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠生長(zhǎng)釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒，英文名：GHRP-Ghrelin ELISA Kit

CTLL-2(小鼠T細(xì)胞)根土壤桿 Agrobacterium tumefaciens　　人神經(jīng)連接蛋白3(Neuroligin-3)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠磷脂酶C(PLC)ELISA試劑盒，英文名：PLC ELISA Kit

酒假絲酵母 Candida kefyrA2780(卵巢細(xì)胞)　　人同源異形盒蛋白OTX2(Homeobox protein OTX2)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠肌球蛋白(MYS)ELISA試劑盒，英文名：MYS ELISA Kit

豌豆根瘤 Rhizobium leguminosarum牛鏈球 Streptococcus bovis　　人5'AMP活化蛋白激酶催化亞基α-1(AMPK subunit alpha-1)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA試劑盒，英文名：FASL ELISA Kit

MGC803全細(xì)胞裂解液苜蓿中華根瘤 Sinorhizobium meliloti　　特異性β1-糖蛋白1ELISA試劑盒人96T15.6-1000 ng/mL大鼠δ氨基乙酰丙酸脫水酶(ALAD)ELISA試劑盒，英文名：ALAD ELISA Kit

地衣芽孢桿 Bacillus licheniformisPBS(10X)　　人胰島再生源蛋白3 - alpha(REG-3-alpha)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒，英文名：17-OHP ELISA Kit

變幻青霉 Penicillium variabile粘質(zhì)沙雷氏 Serratia marcescens　　人磷酸鞘氨醇磷酸酶1(SPP1)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠血紅素氧合酶1(HO1)ELISA試劑盒，英文名：HO1 ELISA Kit

成骨肉瘤細(xì)胞雙環(huán)林地菇 Agaricus placomyces　　人絲氨酸肽酶抑制因子K1(SPINK1)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠神經(jīng)元正五聚蛋白Ⅱ(NPTX2)ELISA試劑盒，英文名：NPTX2 ELISA Kit

普通變形桿 Proteus vulgaris胰腺腺泡細(xì)胞　　人轉(zhuǎn)移核糖核酸假尿苷合成酶1(TRUB1)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠聚集蛋白聚糖(AGC)ELISA試劑盒，英文名：AGC ELISA Kit

ADAM33解整合素金屬蛋白酶33檢測(cè)試劑盒C20orf43  20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框43抗體 規(guī)格: 0.1ml

C21orf128  21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框128抗體 規(guī)格: 0.2mlBAAT  鏈脂肪酸?；o酶A水解酶抗體 規(guī)格: 0.2ml

C21orf2  21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框2抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-CREB-1(Ser142)  磷酸化CREB-1抗體 規(guī)格: 0.1ml

C21orf55/DnaJC28  21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框55抗體 規(guī)格: 0.2mlHPRT  次黃嘌呤磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶1抗體 規(guī)格: 0.2ml

C21ORF56  21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框56抗體 規(guī)格: 0.2ml

C21ORF62  21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框62抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-NFAT5 (Ser1197)  磷酸化活化T細(xì)胞核因子5蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

C21orf70  21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框70抗體 規(guī)格: 0.2mlPNPLA6/NTE  含patatin樣磷脂酶6抗體 規(guī)格: 0.1ml

C22orf25  22號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框25抗體 規(guī)格: 0.2ml

C22orf31  22號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框31抗體 規(guī)格: 0.2mlASTE1  ASTE1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

C22orf36  22號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框36抗體 規(guī)格: 0.2ml