操作流程：

（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 

（2）酶標板置4℃，包被過夜。

（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。

（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 

（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內，孵育60min。 

（6）洗板，同（4）。 

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 

（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內，孵育60min。 

（9）洗板，同（4）。 

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。 

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 

（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數據處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

服務：所有的檢測試劑盒均免費代測，您只需要將您準備好的樣本郵寄到我司即可！本地也可以上門收取樣本！全程檢測試劑盒實驗技術指導，免費代做實驗。本公司產品僅用于科研實驗。老客戶可享受優(yōu)惠折扣服務！

產品名稱：2-羥雌二醇試劑盒

貨號：FS-021390

規(guī)格：96T/48T 

保存；2-8℃。

檢測目的：用于檢測血漿，血清及相關液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本.

檢測種屬：大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動植物。

實驗流程:

1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備；

2. 加樣（標準品及樣本）100μL，37°C孵育1小時；

3. 吸棄，加檢測溶液A100μL，37°C孵育1小時；

4. 洗板3次；

5. 加檢測溶液B100μL，37°C孵育30分鐘；

6. 洗板5次；

7. 加TMB底物90μL，37°C孵育10-20分鐘；

8. 加終止液50μL，立即450nm讀數。

試劑和樣本的控制方法：

一、試劑

1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關，我司嚴格按照國家標準進行生產，已獲得國家承認的“三證”，每一個產品都有對應的生產批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產品，不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。

2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。

二、樣本

1.內源性干擾因素：包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；

類風濕因子的控制方法：

①用F(ab)2替代完整的IgG；

②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；

③檢測抗原時，可用2-巰基乙醇加入到標本稀釋液中使RF降解。

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

注意事項:

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間zui好控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4．  如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先將樣本稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數（×5×n）。

5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準

Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(rat)防御素β2抗原（大鼠） 0.5mg

FSH-R(Follicle-stimulating hormone receptor precursor)促卵泡刺受體抗原 0.5mg

KT3 tagKT3 tag標簽抗原 0.5mg

Integrin alpha V/CD51 peptide整合素αV抗原 0.5mg

MyD88 (myeloid differential protein-88)髓樣分化蛋白抗原 0.5mg

PDCD4(programmed cell death 4)凋亡相關蛋白4抗原 0.5mg

Smac/DIABLO(the second mitochondrial activator of caspase)線粒體促凋亡蛋白抗原 0.5mg

TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)促甲狀素受體抗原 0.5mg

Dnmt3a(cytosine-5)-methyltransferase 3A)DNA甲基轉移酶-3α(抗原) 0.5mg

MICA(MHC class I polypeptide-related sequence A)一種細胞應激分子抗原 0.5mg

Vimentin波形蛋白（抗原） 0.5mg

2,4-D/KLH2，4-二氯苯氧乙酸偶聯(lián)血藍蛋白 5mg

2-羥雌二醇試劑盒通用試劑  3,4-二甲基苯甲醛  3,4-Dimethylbenzaldehyde,98%  5973-71-7  5G

通用試劑  4-異丙氧基苯甲醛  4-Isopropoxybenzaldehyde,97%  18962-05-5  1G

通用試劑  4-溴-3,5-二甲氧基...  4-Bromo-3,5-dimethoxybenzaldehyde,98%  31558-40-4  5G

通用試劑  2-芐氧基苯甲醛  2-Benzyloxybenzaldehyde,98%  5896-17-3  10ML

通用試劑  3,5-二溴苯甲醛  3,5-Dibromobenzaldehyde,98%  56990-02-4  1G

通用試劑  4-(3-吡啶基)苯甲醛  4-(Pyridin-3-yl)benzaldehyde,98%  127406-55-7  1G

通用試劑  3-氟吡啶-2-甲醛  3-Fluoropyridine-2-carboxaldehyde,98%  31224-43-8  250MG

通用試劑  咪唑-2-甲醛  Imidazole-2-carboxaldehyde,97%  10111-08-7  1G

通用試劑  4-(4-氟苯基)-6-異...  4-(4-Fluorophenyl)-6-isopropyl-2-(N-me...  147118-37-4  5G

通用試劑  4-異喹啉甲醛  4-Isoquinolinecarboxaldehyde,97%  22960-16-3  250MG

通用試劑  5-氯-1,3-二甲基-1H...  5-Chloro-1,3-dimethyl-1H-pyrazole-4-ca...  27006-76-4  1G