
商品屬性:
產(chǎn)品名稱
英文名稱
Lncap
產(chǎn)品貨號
AXB9766
培養(yǎng)條件
氣相:95%空氣+5%二氧化碳;
生長特性
貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬
人
凍存條件
無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存
組織來源
前列腺;左鎖骨結(jié)癌轉(zhuǎn)移灶
用途
僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞別稱;LNCaP;人前列腺癌細(xì)胞
種屬來源;人
年齡性別;男;50歲
組織來源;前列腺;左鎖骨結(jié)癌轉(zhuǎn)移灶
生長特性;貼壁生長
細(xì)胞形態(tài);上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞代數(shù);10代以內(nèi)
背景介紹;LNCaP細(xì)胞由HoroszewiczJS于1977年從一名50歲的明確診斷為轉(zhuǎn)移性前列腺癌的白人男性患者的左鎖骨上結(jié)細(xì)針穿刺的活體組織中分離建立的。5-α-雙氫睪酮可影響該細(xì)胞的生長和酸性磷酸酶的產(chǎn)生。該細(xì)胞不形成均一的單層而是成簇生長,所以傳代的時(shí)候要反復(fù)吹打形成單個(gè)細(xì)胞;該細(xì)胞貼壁不牢,達(dá)不到匯合狀態(tài),而且會(huì)使培養(yǎng)基迅速變酸;傳代后48h內(nèi)一定要保持培養(yǎng)瓶靜止,如果此時(shí)挪動(dòng)培養(yǎng)瓶,會(huì)使大部分細(xì)胞從瓶底脫落。如果出現(xiàn)此種情況,需要重新孵育24~48h使細(xì)胞重新貼壁,細(xì)胞貼壁后可更換培養(yǎng)基。
特別注意;1. LNCaP細(xì)胞長得較慢,復(fù)蘇和傳代后需24-48小時(shí)貼壁。該細(xì)胞貼壁不牢,僅僅輕輕地吸附在皿底上,不形成匯合,很快使培養(yǎng)基變酸。生長很慢,傳代后48小時(shí)內(nèi)不應(yīng)移動(dòng)。2.細(xì)胞封包、寄出時(shí),罐裝運(yùn)輸后通常多數(shù)細(xì)胞從培養(yǎng)瓶底分離,懸浮在培養(yǎng)基中。收到后,在通常培養(yǎng)單層細(xì)胞的條件下培養(yǎng)24到48小時(shí),以使細(xì)胞再貼壁,此后換上新鮮培養(yǎng)液。如仍有細(xì)胞漂浮,需將培養(yǎng)瓶內(nèi)容物收集,800rpm離心5分鐘,用新鮮培養(yǎng)液重懸并培養(yǎng)到一個(gè)6cm培養(yǎng)皿或T25培養(yǎng)瓶中。
STR位點(diǎn)信息;Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,11;D13S317:10,12;D16S539:11;D18S51:9,11,12;D19S433:13.2,15;D21S11:29,32.2;D2S1338:16,17;D3S1358:16;D5S818:11,12;D7S820:8.1,9.1,10.3;D8S1179:12,14;FGA:19,20;TH01:9;TPOX:8,9;vWA:16,18;
使用權(quán)限;A類
細(xì)胞規(guī)格;1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測;無
保藏機(jī)構(gòu);中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞資源中心
培養(yǎng)基;RPMI-1640+ FBS 10%+p/s 1%
培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件;無血清凍存液,液氮儲(chǔ)存

細(xì)胞培養(yǎng)操作:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:

(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:

FOXI3蛋白抗體 FOXI3
T細(xì)胞急性細(xì)胞性白血病1蛋白/瘤蛋白5抗體 Anti-Tal1 親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIA抗體 Anti-PPIA/Cyclophilin A/CYPA
造血蛋白1抗體 NCKAP1L
熱休克蛋白β7抗體 HSPβ7
轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白1抗體 Anti-VGLL1 鼻咽癌細(xì)胞相關(guān)基因6抗體 Anti-NGX6/C9orf127
固生蛋白M抗體 Anti-ODZ1/Tenascin M 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體 Anti-Phospho-SEK1/MKK4 (Ser257/Thr261)
神經(jīng)細(xì)胞粘附分子NrCAM抗體 NrCAM
環(huán)指蛋白43抗體 Anti-RNF43 轉(zhuǎn)醛醇酶抗體 Anti-Transaldolase 1人甲狀旁腺(PTH)elisa分析檢測試劑盒 PTHELISAKit
人雌酮(estrone,E1)elisa分析檢測試劑盒 E1ELISAkit
大鼠叉頭框蛋白P3(FoxP3)elisa分析檢測試劑盒 FOXP3 ELISA Kit
大鼠糖蛋白130(gp130)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測 長春質(zhì)堿含量測試盒
人甘氨酸elisa檢測試劑盒 通用腺病毒骨架載體(pAdEasy-1)
KIAA1841蛋白抗體 KIAA1841
Lncap(前列腺癌細(xì)胞)染色質(zhì)修飾蛋白1B抗體 CHMP1B
植物(擬南芥)超氧化物歧化酶[銅鋅]2,葉綠體(CSD2)elisa分析檢測試劑盒 chloroplastic(CSD2)ELISA kit