
商品屬性:
產(chǎn)品名稱
英文名稱
MIA-PACA-2:MIAPACA2
產(chǎn)品貨號(hào)
A01X856
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%,
生長(zhǎng)特性
半貼半懸
細(xì)胞形態(tài)
上皮樣貼壁細(xì)胞,伴有圓形漂浮細(xì)胞
產(chǎn)品種屬
人
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
組織來源
見說明
用途
僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
生長(zhǎng)特性 半貼半懸
細(xì)胞形態(tài) 上皮樣貼壁細(xì)胞,伴有圓形漂浮細(xì)胞
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)方案A(默認(rèn))
生長(zhǎng)培養(yǎng)基:
DMEM+10%FBS+2.5%HS+1%P/S
培養(yǎng)條件:
氣相:空氣,95%;CO2,5%, 溫度:37℃
推薦傳代比例 1:3-1:8
推薦換液頻率 2-3次/周
參考資料(來源文獻(xiàn))
背景描述 The MIA PaCa-2 cell line was
established by A. Yunis, et al. in 1975 from tumor tissue of the pancreas
obtained from a 65-year-old Caucasian male.
年齡(性別) 男性;65歲
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 胰腺癌細(xì)胞
生物等級(jí) BSL-1
倍增時(shí)間 26 hours (PubMed=25984343);
25.7 +- 4.3 hours (PubMed=27067801); 40 hours, 18 hours, in serum-free medium
(PubMed=23386380); ~40 hours (ATCC); ~30-40 hours (DSMZ)
基因表達(dá)情況 human colony stimulating
factor, subclass I (CSF-I); plasminogen activator
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-1420DSMZ; ACC-733ECACC; 85062806JCRB; JCRB0070

細(xì)胞培養(yǎng)操作:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:

(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:

phospho-PRKD1 (Ser738) DMRTB1蛋白抗體
核帽結(jié)合蛋白2抗體 NCBP2
環(huán)指蛋白142抗體 Anti-SH3MD2/RNF142 磷酸化蛋白激酶C mu型抗體
四分子交聯(lián)體10抗體(四旋蛋白) Anti-TSPAN10/Oculospanin 黑色素瘤優(yōu)先表達(dá)抗原抗體 Anti-PRAME
纈氨酰-tRNA合成酶抗體 Anti-vars2 磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶NEK9抗體 Anti-phospho-NEK9(Thr210)
5號(hào)染色體開放閱讀框4抗體 C5ORF4
氧化應(yīng)激誘導(dǎo)生長(zhǎng)抑制因子1抗體 Anti-OSGIN1 DMRTB1
RAS癌基因相關(guān)蛋白Rab6C抗體 Anti-RAB6C 糖原**素相互作用蛋白抗體 Anti-TRIM7/RNF90人甲狀腺刺激球蛋白(TSI)elisa生化檢測(cè)試劑盒 TSIELISAKit
細(xì)胞TRAIL 蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒 綿羊5羥二十碳四烯酸(5-HETE)elisa生化檢測(cè)試劑盒
大鼠超氧化物歧化酶1,可溶性(SOD1)elisa生化檢測(cè)試劑盒 soluble(SOD1)ELISA kit
大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)elisa檢測(cè)試劑盒 小鼠脂蛋白α(Lp-α)elisa檢測(cè)試劑盒
人超氧化物歧化酶(SOD)elisa檢測(cè)試劑盒 糖類總量硫酸-苯酚比色法定量檢測(cè)試劑盒
KIAA1671蛋白抗體 KIAA1671
MIA-PACA-2人胰腺癌細(xì)胞ATP酶H+轉(zhuǎn)運(yùn)溶酶體輔助蛋白2抗體 ATP6IP2
小鼠V-Jun肉瘤病毒癌基因同源物(JUN)elisa檢測(cè)試劑盒 TBS緩沖液10× 500ml