
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠神經(jīng)膠質細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
腦組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
梭形細胞
分類
大鼠原代細胞
貨號
A01X1708
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1) 組織來源于實驗動物的正常腦組織。
2) 細胞鑒定:神經(jīng)膠質纖維酸性蛋白(GFAP)熒光染色法。
3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細胞生長方式:梭形細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代 星形膠質 細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細胞簡介:
神經(jīng)膠質細胞廣泛分布于神經(jīng)系統(tǒng)內,是除了神經(jīng)元以外的所有細胞,在神經(jīng)系統(tǒng)中數(shù)量大約是神經(jīng)元的十倍。具有支持、滋養(yǎng)神經(jīng)元的作用。
膠質細胞與神經(jīng)元一樣也具有細胞凸起,但其胞質凸起不分樹突和軸突。
星形膠質細胞,是膠質細胞中體積大的一種。從胞體發(fā)出許多長而分支的突起,伸展充填在神經(jīng)細胞的胞體及其突起之間,起支持和分隔神經(jīng)細胞的作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
OVAsIgGELISAKit
大鼠SHC轉化蛋白1(SHC1)elisa分析檢測試劑盒
SHC1 ELISA kit
人胱天蛋白酶12(Casp-12)elisa分析檢測試劑盒
Casp-12ELISAKit
大鼠組織因子(TF)elisa檢測試劑盒
分子生物級溴化乙錠(Ethidium Bromide)染色液
小鼠表皮生長因子受體2(EGFR2)elisa檢測試劑盒
大鼠Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)elisa檢測試劑盒
新德里超級金屬β-內酰胺酶-1(NDM-1)elisa分析檢測試劑盒
NDM-1 ELISA kit
人白介素3(IL-3)elisa分析檢測試劑盒
HumanInterleukin3ELISAKIT
果菜甲酸比色法定量檢測試劑盒
小鼠C4結合蛋白α(C4BPα)elisa檢測試劑盒
大鼠纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)elisa檢測試劑盒
細胞PAR-2蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒
眼部白化病相關蛋白OA1/蛋白偶聯(lián)受體143抗體
OA1
9號染色體開放閱讀框84抗體
C9orf84
精子形成相關凋亡蛋白7抗體 Anti-TSARG7
蛋白激酶A抗體 Anti-PKA/PKAcat/PKACB
肝糖原磷酸化酶抗體 Anti-PYGL
磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶II β(casein kinase IIβ)抗體 Anti-phospho-CK II beta (Ser209)
Cy5標記的小鼠抗牛IgG H&L
大鼠神經(jīng)膠質細胞FASL ELISA Kit
山羊丙二醛(MDA)elisa分析檢測試劑盒
AEP; Asparaginyl endopeptidase; EC 3.4.22.34; LGMN; LGMN1; Protease, cysteine 1; protease, cysteine, 1 (legumain); PRSC1; LGMN_HUMAN.
大鼠神經(jīng)膠質細胞
兔DC細胞
KNS-89人腦膠質細胞瘤細胞
MDA-MB-436人乳腺癌細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。