培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長(zhǎng)。如果無污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人韌帶成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
關(guān)節(jié)韌帶組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
成纖維樣細(xì)胞
分類
人原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1408
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）細(xì)胞來源于手術(shù)取得的正常人關(guān)節(jié)韌帶組織。
2)細(xì)胞鑒定：纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：成纖維樣細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
韌帶屬于以彈性纖維為主的致密結(jié)締組織。粗大的彈性纖維或平行排列成束，如項(xiàng)韌帶和黃韌帶。韌帶白色帶狀的結(jié)締組織，質(zhì)堅(jiān)韌，有彈性，能把骨骼連接在一起，并能固定某些臟器如肝、脾、腎等的位置。韌帶附著于骨骼的可活動(dòng)部分，但限制其活動(dòng)范圍以免損傷。當(dāng)遭受暴力，產(chǎn)生非生理性活動(dòng)，韌帶被牽拉而超過其耐受力時(shí)，即會(huì)發(fā)生損傷。
公司正在出售的產(chǎn)品：
體液氧化應(yīng)激活性氧（ROS）比色法測(cè)定試劑盒（單線態(tài)氧氣）
LYSMD2蛋白抗體
LYSMD2
細(xì)胞角蛋白3+12抗體
Cytokeratin 3+12
小鼠FMS樣激酶3配體(Flt3L)elisa檢測(cè)試劑盒
辣根過氧化物酶 EC1.11.1.7 100 mg/瓶
冰凍切片組織CASPASE-2蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
磷酸果糖激酶（PFK）/6-磷酸果糖激酶/果糖-6-磷酸激酶測(cè)試盒
p105 CAF1蛋白抗體
p105 CAF1
丙型肝炎病毒NS5B抗體
Hepatitis C virus NS5B
腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子2抗體 Anti- TRAF2
配對(duì)盒基因5抗體 Anti-PAX5
磷酸化α型-過氧化酶活化受體抗體 Anti-phospho-PPAR alpha(Ser12)
5-羥色胺受體1F抗體 Anti-5HT1F Receptor/SR-1F
細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑2B抗體
CDKN2B / p15 INK4b
丘腦分泌素受體2抗體
Orexin Receptor 2
鋅指蛋白449抗體 Anti-ZNF449
神經(jīng)前體細(xì)胞表達(dá)蛋白1抗體 Anti-NEDD1
環(huán)指蛋白186抗體 Anti-RNF186
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SRPK7抗體 Anti-SFRS7/9G8/SRp20
大鼠FMS樣激酶3配體(Flt3L)elisa分析檢測(cè)試劑盒
人韌帶成纖維細(xì)胞Rabbit Anti-Bovine IgG H&L / PE-Cy5.5
受體活性修飾蛋白3抗體
ABCC10; ATP binding cassette, sub family C (CFTR/MRP), member 10; ATP binding cassette, subfamily C, member 10; ATP-binding cassette sub-family C member 10; EST182763; mFLJ00002; MRP7; MRP7_HUMAN; Multidrug resistance associated protein 7; Multidrug resistance-associated protein 7; SIMRP7; SIMRP7.
人韌帶成纖維細(xì)胞
人類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞
人黑色素瘤細(xì)胞；MNT-1
neuro-2a小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。