實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

產(chǎn)品及特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設(shè)計的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：嗜吞噬細胞無形體PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品貨號：FS-P63566
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運輸及保存
低溫運輸，-20℃保存，保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX（根據(jù)機型決定，具體見使用方法）。
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法：
一、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管，分別為7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品，必須設(shè)置N+2個提取，多出的一個是PC（樣品制備陽性對照），一個是NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系，在樣品制備室進行）
10. 如果只做1次重復(fù)，則標記N+9個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照，6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù)，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）

馬兜鈴酸A去甲基代謝產(chǎn)物 Aristolochic Acid Ia 38965-71-8 質(zhì)量規(guī)格：美國進口

非洛地平(標準品) Felodipine 72509-76-3 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品用于含量測定

 載玻片細胞βCOLLAGEN II蛋白表達NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

(S)-普拉克索二鹽酸化物 (S)-Pramipexole Dihydrochloride 104632-25-9 質(zhì)量規(guī)格：美國進口

 組蛋白H2B-K12乙?；瘷z測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次等

加巴噴丁-內(nèi)酰胺 Gabapentin-lactam 64744-50-9 質(zhì)量規(guī)格：美國進口

線蟲乙烷亞硝基脲（ENU）誘導(dǎo)突變試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：10次

美洛昔康（標準品） Meloxicam 71125-38-7 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品

石蠟切片組織CDK3蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

冰凍切片組織NF KAPPA B P50蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：10/20次

SB3-18 SB3-18 13177-41-8 質(zhì)量規(guī)格：BR

4,4'-雙甲氧基三苯甲基氯 DMT-CL 40615-36-9 質(zhì)量規(guī)格：>97%

氘代鹽酸(5g ) Deuterium Chloride 7698-05-7      質(zhì)量規(guī)格：D, 99.5%  DCL 35% IN D2O

體液酸性磷酸酶總活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

 P38蛋白表達西方雜交分析試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：5次

水稻樣品處理試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

嗜吞噬細胞無形體PCR檢測試劑盒沙門氏顯色培養(yǎng)基 英文名稱：Salmonella Chromogenic Medium 產(chǎn)品規(guī)格：1000(ML) 產(chǎn)品用途：用于沙門氏的顯色培養(yǎng)沙門氏顯亮紅色用途:用于沙門氏的快速檢測。用法稱取本品 7.26g,加入 200ml 蒸餾水,加入添加劑 3ml,加熱煮沸溶解并不停攪拌,加熱 3-5 分鐘。冷卻至 45-50℃時,傾入無平皿。

李斯特氏顯色培養(yǎng)基 英文名稱：Listera Chromogenic Medium 產(chǎn)品規(guī)格：1000(ML) 產(chǎn)品用途：用于李斯特氏的顯色培養(yǎng)，單增李斯特氏顯藍色，外圍有一不透明環(huán)李斯特氏顯色培養(yǎng)基是高科園生物技術(shù)有限公司研制，可快速檢測食品和藥品中單增李斯特氏。陰性結(jié)果可在3天內(nèi)檢測完成。單增李斯特氏顯藍色，落周圍有一不透明環(huán)。蛋白胨提供氮源和氨基酸，氯鈉維持滲透壓，瓊脂是凝固劑，氯鋰抑制革蘭氏陰性生長，抑劑抑制除李氏外的革蘭氏陽性生長。

金黃色葡萄球顯色培養(yǎng)基 英文名稱：Staphylococcus Chromogenic Medium 產(chǎn)品規(guī)格：1000(ML) 產(chǎn)品用途：用于金黃色葡萄球的顯色培養(yǎng)，金黃色葡萄球顯藍綠色金黃色葡萄球顯色培養(yǎng)基是公司改良的培養(yǎng)基，用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中金黃色葡萄球的快速檢測，24小時內(nèi)出結(jié)果。金黃色葡萄球顯藍綠色落，李斯特氏顯紫色，絕大多數(shù)革蘭氏陰性被抑制。用法稱取本品17.26g 加入200ml蒸餾水，加熱完全溶解，煮沸2-3min，冷至50℃左右時，傾入無平皿，備用。貯存制備好的平板可保存2-5天，應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處， 保存溫度2-8℃，注意避光保存。失效干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。操作步驟涂布法:1、按國家標準、SN標準、ISO標準或其它方法制備樣品液；2、取1ml適宜稀釋度的樣品液加入表面干燥的金黃色葡萄球顯色培養(yǎng)基平板中心，每個稀釋度做2個平板；3、以L形玻璃棒將樣品液涂布于瓊脂表面，避免涂到平板邊緣，將平板正置直至樣品液被培養(yǎng)基吸收；4、平板倒置放入培養(yǎng)箱36±1℃培養(yǎng)18-24h，典型的金黃色葡萄球為凸起的藍綠色落；5、計數(shù)平板上所有凸起的藍綠色落。劃線法:1、按國家標準、SN標準、ISO標準或其它方法制備樣品液；2、取10ul-20ul樣品液劃線接種于已凝固好的金黃色葡萄球顯色培養(yǎng)基平板上；3、倒置放入培養(yǎng)箱36±1℃培養(yǎng)18-24h，典型的金黃色葡萄球為凸起的藍綠色落；注意：金黃色葡萄球鏡檢為革蘭氏陽性球，且兔血漿凝固酶試驗為陽性。

霉和酵母顯色培養(yǎng)基 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：1000(ML) 產(chǎn)品用途：用于霉和酵母的顯色培養(yǎng)霉和酵母顯色培養(yǎng)基是公司改良的培養(yǎng)基，用于霉和酵母的顯色培養(yǎng)。于1000ml蒸餾水中，115℃高壓滅20分鐘備用。