實驗注意事項：
1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括定量和相對定量）和定性分析。
主要服務：DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

產(chǎn)品及特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設計的專一性引物，與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測，避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：丙型肝炎病毒PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：48T
產(chǎn)品貨號：FS-P63666
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運輸及保存
低溫運輸，-20℃保存，保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX（根據(jù)機型決定，具體見使用方法）。

實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法：
一、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管，分別為7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品，必須設置N+2個提取，多出的一個是PC（樣品制備陽性對照），一個是NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設置qPCR反應（20 μL體系，在樣品制備室進行）
10. 如果只做1次重復，則標記N+9個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照，6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復，則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）

二氫睪酮,雄諾龍 Stanolone/Androstanolone 521-18-6 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR

組織BTK激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

組織葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）活性酶動力比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：50次

植物DNA甲基轉移酶-1（MET-1）活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

1,3-二咖啡?？鼘幩?標準品) Cynarin 1182-34-9 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

轉基因棉花MON531品系基因檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

咖啡甘素（dulcin）含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

細胞CDK3/CYCLIN E激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

D-環(huán)丙基丙氨酸 D-Cyclopropylalanine 121786-39-8 質(zhì)量規(guī)格：BR

植物F型氫ATP酶（H＋－ATPase）活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

細胞可溶性總核蛋白制備試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

分子篩4A(2mm-3mm,干燥劑用 ) Molecular sieves, 4 ? 70955-01-0 質(zhì)量規(guī)格：2mm-3mm,干燥劑用

草毒死（標準品）  Allidochlor 93-71-0 質(zhì)量規(guī)格：分析標準品

動物組織線粒體F型ATP酶（F type ATPase）活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格：20次

腎臟髓質(zhì)肽（22-52），人 Adrenomedullin (22-52),human 159899-65-7 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

BES free acid; N,N-(2-羥乙基)-2-氨基乙磺酸 BES free acid 10191-18-1 質(zhì)量規(guī)格：>99%

丙型肝炎病毒PCR檢測試劑盒LG培養(yǎng)基 英文名稱：(Linden Grain Medium) 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于霉、酵母、耐熱霉及細總數(shù)的檢測，可用于PET瓶及無罐裝生產(chǎn)線的無驗證。用途：用于霉、酵母、耐熱霉及細總數(shù)的檢測，可用于PET瓶及無罐裝生產(chǎn)線的無驗證。成分：胰蛋白胨 、葡萄糖、酵母浸粉、硫酸銨、磷酸二氫鉀、硫酸鎂使用方法 ：稱取本品29.5g，加入蒸餾水或去離子水1 L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝試管或三角瓶，121℃ 滅15min。質(zhì)量控制 ：配成的LG培養(yǎng)基為透明液體，質(zhì)控株接種后于28～32℃ 培養(yǎng)3~5天，結果如下：貯 存 ：貯存于避光、陰涼干燥處，用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。

種培養(yǎng)基 英文名稱：Strain Medium(for B.Cereus) 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于四環(huán)素檢定中蠟樣芽孢桿的培養(yǎng)(SN標準)產(chǎn)品用途：用于四環(huán)素檢定中蠟樣芽孢桿的培養(yǎng)(SN標準)產(chǎn)品用法：稱取本品31.5克，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，121℃高壓滅15分鐘備用。

四環(huán)素檢定瓊脂 英文名稱：Tetracyline Examination Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于四環(huán)素殘留的微生物學檢定(SN標準)產(chǎn)品用途：用于四環(huán)素殘留的微生物學檢定(SN標準)產(chǎn)品用法：稱取本品24.5克，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，分裝三角瓶，121℃高壓滅15分鐘，備用。

葡萄糖胰蛋白胨瓊脂 英文名稱：Glucose Tryptone Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于嗜熱芽孢(需氧芽孢總數(shù),平酸芽孢和厭氧芽孢)分離培養(yǎng)(SN標準)用途:用于嗜熱芽孢( 需氧芽孢總數(shù)、平酸芽孢和厭氧芽孢 )的分離培養(yǎng)。成分(g/L)胰酪蛋白胨 10.0葡萄糖 5.0瓊脂 15.0溴紫 0.04pH值6.7 ± 0.1 25℃用法稱取本品 30.0g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,121℃高壓滅 15 分鐘,備用。

蛋白胨鹽溶液 英文名稱：Peptone Salt Solution 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于嗜冷需氧芽孢及嗜熱需氧芽孢數(shù)測定用稀釋液用途:用于嗜冷、需氧芽孢及嗜熱需氧芽孢數(shù)測定用稀釋液。用法稱取本品 9.5g,加熱溶解 于 1000ml 蒸餾水中,分裝試管或燒瓶,每管 9ml、每瓶 90ml 或 225ml,121℃高壓滅 15 分鐘,備用。

檢定培養(yǎng)基 英文名稱：Test Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于嗜熱脂肪芽孢桿檢定培養(yǎng)用途:用于嗜熱脂肪芽孢桿檢定培養(yǎng)。成分(g/L)牛肉膏 3.0蛋白胨 5.0大豆蛋白胨 0.3葡萄糖 5.25氯鈉 0.5磷酸氫二鉀 0.25吐溫-80 1.0溴紫 0.06瓊脂 15.0pH值7.8 ± 0.2 25℃用法稱取本品 30.36g ,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝每瓶 100ml,121℃高壓滅 15 分鐘。

種芽孢培養(yǎng)基 英文名稱：Bacillus Bacteria Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于嗜熱脂肪芽孢桿芽孢培養(yǎng)用途:用于嗜熱脂肪芽孢桿芽孢培養(yǎng)。用法稱取本品 47.5g ,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝300ml 于克氏瓶內(nèi),121℃高壓滅 15 分鐘。

細保存培養(yǎng)基 英文名稱：Bacterial Storage Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于嗜熱脂肪芽孢桿種保存用途:用于嗜熱脂肪芽孢桿種保存。用法稱取本品 40.0g ,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝試管,121℃高壓滅 15 分鐘,制成斜面。

BAT培養(yǎng)基 英文名稱：BAT Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于檢測果汁中耐熱嗜酸用途:用于果汁中耐熱嗜酸檢測。用法稱取本品 29.0g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅 15分鐘,冷至 45-50℃時,加入適量無 1 N Hcl 或 1 NH2SO4 調(diào)整 pH 值至 4.0±0.2,混勻,傾入無平皿,備用。

肝肉瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g 產(chǎn)品用途：用于鹽還原厭氧孢子的計數(shù)用法：稱取本品34.87g，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，分裝，121℃高壓滅15min，備用