操作流程：

（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 

（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 

（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 

（6）洗板，同（4）。 

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 

（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 

（9）洗板，同（4）。 

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 

（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。

服務(wù)：所有的檢測(cè)試劑盒均免費(fèi)代測(cè)，您只需要將您準(zhǔn)備好的樣本郵寄到我司即可！本地也可以上門收取樣本！全程檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)，免費(fèi)代做實(shí)驗(yàn)。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。老客戶可享受優(yōu)惠折扣服務(wù)！

產(chǎn)品名稱：KRT9角蛋白9進(jìn)口ELISA試劑盒
英文名稱：Keratin 9(KRT9)ELISA Kit

貨號(hào)：A102384

規(guī)格：96T/48T 

保存；2-8℃。

檢測(cè)目的：用于檢測(cè)血漿，血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本.

檢測(cè)種屬：大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動(dòng)植物。

實(shí)驗(yàn)流程:

1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；

2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100μL，37°C孵育1小時(shí)；

3. 吸棄，加檢測(cè)溶液A100μL，37°C孵育1小時(shí)；

4. 洗板3次；

5. 加檢測(cè)溶液B100μL，37°C孵育30分鐘；

6. 洗板5次；

7. 加TMB底物90μL，37°C孵育10-20分鐘；

8. 加終止液50μL，立即450nm讀數(shù)。

試劑和樣本的控制方法：

一、試劑

1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，已獲得國家承認(rèn)的“三證”，每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的生產(chǎn)批號(hào)，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會(huì)有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。

2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測(cè)定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測(cè)定需求。

二、樣本

1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；

類風(fēng)濕因子的控制方法：

①用F(ab)2替代完整的IgG；

②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；

③檢測(cè)抗原時(shí)，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。

檢測(cè)程序：

1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。

注意事項(xiàng):

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zui好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4．  如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。

5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。顯色劑B請(qǐng)避光保存。

7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)

淺紅酵母 Rhodotorula pallidaBNL CL.2(小鼠胚胎肝細(xì)胞)　　ELISA Kit for Human Sorting nexin-1大鼠載脂蛋白C1(APOC1)ELISA試劑盒，英文名：APOC1 ELISA Kit

黑曲霉 Aspergillus niger動(dòng)物雙歧桿 Bifidobacterium animalis　　ELISA Kit for Human Solute carrier family 2, facilitated glucose transporter member 4大鼠糖原磷酸化酶L(PYGL)ELISA試劑盒，英文名：PYGL ELISA Kit

大豆慢生根瘤 Bradyrhizobium japonicum三葉草根瘤 Rhizobium trifolii　　ELISA Kit for Human Calcium-binding mitochondrial carrier protein Aralar1大鼠鈉/鉀離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶β4肽(ATP1β4)ELISA試劑盒，英文名：ATP1β4 ELISA Kit

RL95-2(內(nèi)膜細(xì)胞)STO(小鼠胚成纖維細(xì)胞)　　ELISA Kit for Human Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4大鼠過氧化物酶體生物合成因子2(PEX2)ELISA試劑盒，英文名：PEX2 ELISA Kit

桿屬 Lactobacillus sp.植物桿 Lactobacillus plantarum　　ELISA Kit for Vitamin B1大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子18(FGF18)ELISA試劑盒，英文名：FGF18 ELISA Kit

根瘤香菇 Lentinula edodes　　大鼠L1-細(xì)胞粘附分子(L1CAM)ELISA試劑盒，英文名：L1CAM ELISA Kit

TT(甲狀腺導(dǎo)管細(xì)胞)胃順鉑耐藥株　　豚鼠內(nèi)皮素1(EDN1)ELISA試劑盒，英文名：EDN1 ELISA Kit

溶藻弧 Vibrio alginolyticus6-10B, 鼻咽細(xì)胞系　　ELISA Kit for Human Adiponectin receptor protein 1小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA試劑盒，英文名：VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit

瓜笄霉異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala　　ELISA Kit for Human Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 10小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA試劑盒，英文名：HSP gp96 ELISA Kit

枯草芽胞桿 Bacillus subtilis大豆慢生根瘤 Bradyrhizobium japonicum　　人亞鐵螯合酶(FECH)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠腎臟腦蛋白(KIBRA)ELISA試劑盒，英文名：KIBRA ELISA Kit

KRT9角蛋白9進(jìn)口ELISA試劑盒CCDC98  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白98抗體 規(guī)格: 0.2ml

CCK8  膽囊收素8抗體 規(guī)格: 0.1ml

CCL1/TCA3/I-309  嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白CCL1抗體 規(guī)格: 0.1ml

CCL11/Eotaxin 1  嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

CCL12/MCP5  單核細(xì)胞趨化蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2mlWNK3 protein  絲氨酸/蘇氨酸激酶家族成員的基因WNK3抗體 規(guī)格: 0.1ml

CCL13/MCP-4  單核細(xì)胞趨化蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2mlCBX1/HP1 β  異染色體同源蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

CCL14/HCC-1  嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白14抗體 規(guī)格: 0.2mlCyr61/IGFBP10/CCN1  富半胱氨酸肝素結(jié)合蛋白61抗體 規(guī)格: 0.1ml

CCL16/HCC-4  巨噬細(xì)胞炎性蛋白16抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-mouse IgG/FITC  FITC標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.3ml

CCL17/ABCD2  胸活化調(diào)節(jié)趨化因子抗體 規(guī)格: 0.1mlPI3 Kinase p110 beta  磷脂酰肌醇激酶（PI3Kβ）抗體 規(guī)格: 0.1ml

CCL19/MIP-3 beta  巨噬細(xì)胞炎性蛋白19抗體 規(guī)格: 0.2ml