細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	K7M2WT(K7M2-WT)-LUC小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記	英文名稱	K7M2WT(K7M2-WT)-LUC:K7M2WTK7M2WTLUC
產(chǎn)品貨號(hào)	A01X1065	培養(yǎng)條件
生長(zhǎng)特性	貼壁生長(zhǎng)	細(xì)胞形態(tài)	成骨細(xì)胞
產(chǎn)品種屬	小鼠	凍存條件	詳見說明
組織來源	轉(zhuǎn)移灶: 肺	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞介紹

抗原表達(dá): CD31 陽(yáng)性 [PubMed:1315100] 產(chǎn)物: 八因子 [PubMed: 11315100]; 整合唾液酸蛋白 (BSP) [PubMed11315100]; biglyan [PubMed: 11315100]; decorrin [PubMed:1315100]; villin 2 (ezrin) [PubMed: 11325848]. 骨唾液酸蛋白, biglyan, decorrin, 和 osteopontin 的表達(dá)顯示其骨家族細(xì)胞特性。 在本庫(kù)通過支原體檢測(cè)。該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。

細(xì)胞特性

1） 來源：BALB/c 器官: 骨 : 骨肉瘤 來源轉(zhuǎn)移灶: 肺 細(xì)胞類型: 成骨細(xì)胞;

2） 形態(tài)：成骨細(xì)胞  貼壁生長(zhǎng)

3） 含量：>1×10?  細(xì)胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途：僅供科研使用。

17號(hào)染色體開放閱讀框78抗體       C17orf78

分泌粒蛋白3抗體  Anti-SCG3/SgIII       環(huán)指蛋白149抗體  Anti-RNF149

β-甘露糖苷酶溶酶體樣蛋白抗體       MANBAL

破傷風(fēng)重鏈抗體       Tetanus Toxin heavy chain

蘋果14-3-3蛋白抗體(植物)  Anti-14-3-3 family protein       4-磷酸磷脂酰肌醇5激酶1樣蛋白抗體  Anti-PIP5KL1/PIPKH

泛素結(jié)合酶E2F抗體  Anti-NCE2       WRCH1抗體  Anti-WRCH-1

補(bǔ)體C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白4抗體      CTRP4

蛋白激酶C α抗體  Anti-PKC alpha       TIP30蛋白抗體  Anti-TIP30GRRP1蛋白抗體       GRRP1

人催產(chǎn)素(OT)elisa分析檢測(cè)試劑盒       OTELISAKit

FITC標(biāo)記小鼠IgG1（型對(duì)照）       Mouse IgG1 / FITC Isotype Control

大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)elisa分析檢測(cè)試劑盒       AFP ELISA Kit

小鼠5羥色胺受體2A(5-HTR 2A)elisa分析檢測(cè)試劑盒       5HTR2AELISAKit

Homer蛋白抗體       Homer

K7M2WT(K7M2-WT)-LUC小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記非典型趨化因子受體3抗體       ACKR3

植物維生素D(VD)elisa分析檢測(cè)試劑盒       VD ELISA Kit

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。