細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	MKN1人胃癌細(xì)胞	英文名稱	PA1：PA-1
產(chǎn)品貨號(hào)	AXB6453	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長特性	貼壁生長	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	無血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
組織來源	胃癌	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞別稱；MKN1；MKN-1；人胃癌細(xì)胞

種屬來源；人

組織來源；胃癌

生長特性；貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)

背景介紹；MKN-1細(xì)胞系由S Akiyama建立，源于一位35歲患有印戒細(xì)胞癌的女性的胃結(jié)。

細(xì)胞規(guī)格；1x106cells/T25或1mL凍存管

支原體檢測；無

培養(yǎng)基；RPMI-1640+10%FBS+1%雙抗

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

Catalase       DOCK10蛋白抗體

N聚糖酶多肽蛋白1抗體       NGLY1

胚胎干細(xì)胞抑制蛋白Suz12抗體  Anti-SUZ12/CHET9       過氧化氫酶抗體

血管**素受體2抗體  Anti-TIE2/CD202b       磷酸化絲/蘇氨酸蛋白激酶Plk1抗體  Anti-Phospho-PLK1(Ser482+Ser486+Ser490)

Wnt信號(hào)抑制因子1抗體  Anti-WIF1       核受體蛋白NR2E1抗體  Anti-NR2E1/Tailless

7號(hào)染色體開放閱讀框45抗體       C7orf45

氧化低密度脂蛋白抗體  Anti-ox-LDL      DOCK10

梅克爾憩室綜合征相關(guān)蛋白5抗體  Anti-RPGRIP1L       凝血酶(凝血因子II)輕鏈抗體  Anti-Thrombin light chain人肌強(qiáng)直蛋白蛋白激酶(DMPK)elisa生化檢測試劑盒       DMPKELISAkit

NEEP21蛋白抗體  Anti-NEEP21       鋅指/環(huán)指蛋白2抗體  Anti-ZNRF2

大鼠白介素21(IL-21)elisa生化檢測試劑盒       IL-21 ELISA Kit

線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅱ/琥珀酸-輔酶Q還原酶測試盒       高多糖多酚植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒

支原體檢測試劑盒20T       大鼠糖原合成酶激酶3α(GSK3A)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測

致死因子惡性腦瘤樣蛋白4抗體       L3MBTL4

MKN1人胃癌細(xì)胞Bcl2相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體       BCLAF1

斯鈣素2抗體  Anti-Stanniocalcin 2       RhoC抗體  Anti-Rho C

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。