
商品屬性:
產(chǎn)品名稱
英文名稱
SW620:SW620
產(chǎn)品貨號
A01X984
培養(yǎng)條件
氣相:95%空氣+5%二氧化碳;
生長特性
貼壁生長
細胞形態(tài)
上皮細胞樣
產(chǎn)品種屬
人
凍存條件
無血清凍存液,液氮儲存
組織來源
結(jié)直腸腺癌,來自轉(zhuǎn)移結(jié)
用途
僅供科研研究實驗
商品詳情:
細胞別稱:SW-620; SW 620; SW.620;人腸癌細胞
種屬來源:人
年齡性別:男;51歲
組織來源:結(jié)直腸腺癌,來自轉(zhuǎn)移結(jié)
生長特性:貼壁生長
細胞形態(tài):上皮細胞樣
背景簡介:SW480源自一位51歲白人男性患者的原位直腸腺癌,而SW620源自同一病人一年后的結(jié)轉(zhuǎn)移灶。該細胞CSAp和直腸抗原3陰性;角蛋白陽性;p53基因第273位密碼子的G→A突變引起Arg→His替代,309位密碼子的C→T突變導致Pro→Ser替代;細胞p53蛋白表達水平升高;癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表達呈陽性;未檢測到癌基因N-myc的表達;不表達Matrilysin(一種與腫瘤侵襲相關的金屬蛋白酶)。有報道稱該細胞表達GM-CSF。ras原癌基
生物等級:1
細胞規(guī)格:1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測:無
基因表達情況:Carcinoembryonic antigen
(CEA) 0.15 ng/10^6 cells/10 days; transforming growth factor alpha; matrilysin.
The cells are negative for expression of CSAp (CSAp-) and colon antigen 3,
negative. The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining. The
line is positive for expression of c-myc, K-ras, H-ras, N-ras, Myb, sis and fos
oncogenes.
保藏機構(gòu):ATCC; CCL-227 ECACC; 87051203 ;中國醫(yī)學科學院基礎醫(yī)學研究所細胞資源中心
培養(yǎng)基:90%L15+10% FBS+PS
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
凍存條件:無血清凍存液,液氮儲存
倍增時間:~20-26 hours
STR鑒定位點Amelogenin:X;CSF1PO:13,14;D13S317:12;D16S539:9,13;D18S51:13;D19S433:13;D21S11:30,30.2;D2S1338:24;D3S1358:15,16;D5S818:13;D7S820:8,9;D8S1179:13;FGA:24;TH01:8;TPOX:11;vWA:16;
細胞培養(yǎng)操作:
1) 復蘇細胞:以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時,進行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細胞,吹打細胞使其均勻分散。
(7)吸棄細胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
(9)細胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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人血清抗體 human serum