細胞簡介：
人毛囊干細胞分離自皮膚毛囊組織；毛囊是表皮細胞連續(xù)形成的袋樣上皮。其基底是真皮凹進的真皮毛，中心是一根毛發(fā)，立毛肌的一側(cè)斜附在毛囊壁上，附著點的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸，毛囊在皮膚表面的開口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下組織中，毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度，它是由包繞毛發(fā)與表皮相連的上皮鞘，以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個結(jié)構(gòu)比較復雜的器官附件組織。毛囊干細胞是在人的毛囊外根鞘隆突部中的一種細胞。毛囊干細胞屬于成體干細胞，在體內(nèi)處于靜止狀態(tài)，在體外培養(yǎng)作用下表現(xiàn)出驚人的增殖能力。研究發(fā)現(xiàn)，毛囊干細胞具有多向分化潛能，它可以分化成表皮、毛囊、皮脂腺，參與皮膚創(chuàng)傷的過程。毛囊干細胞和其它成體干細胞一樣，具有慢周期性、未分化性、自我更新和體外增殖能力強等特點。毛囊干細胞分化經(jīng)毛囊干細胞（hair follicle stem cells，FSC）、短暫增殖細胞（transit amplifying cells，TAC）有絲分裂后分化細胞（postmitotic differentiating cells，PDC）三個階段。毛囊干細胞在光鏡下呈立方形，細胞體積小，核漿比率大，表面光滑，皺褶少，又被稱為非鋸齒形細胞，細胞體積的增大與增殖能力呈負相關(guān)。超微結(jié)構(gòu)顯示細胞表面有少許微絨毛，細胞核存在許多卷曲，染色質(zhì)彌散分布，這些形態(tài)特征均表現(xiàn)出原始細胞的特性。
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組織來源 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
貨號 |
用途 |
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毛囊組織 |
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
A01X1439 |
僅供科研研究實驗 |
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次；
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳3-5代左右；
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介：
公司實驗室分離的人毛囊干細胞采用膠原酶-中性蛋白酶聯(lián)合消化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的人毛囊干細胞經(jīng)CK19、CD200熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
實驗具體步驟：
（1）動物福利：小鼠麻醉犧牲/處死，或者斷頸處死；
（2）小鼠：可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者簡單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min，然后轉(zhuǎn)移至無菌操作臺使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈；
（3）取出心臟組織：用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔，取出心臟組織，置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中；
（4）組織：在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二，充分洗滌里邊的血液，/3次，每次5min；
（5）破碎組織：使用眼科鉗或者剪刀，將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊；（備注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min，
利于后期細胞從組織塊中爬出來，同時能夠消除部分結(jié)締組織等）
（6）種植組織塊：將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次，每次5min，然后使用完全培養(yǎng)基（含有1X雙抗）洗滌一次。經(jīng)過的心臟破碎組織塊經(jīng)過離心后，可以用細頭
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中（備注：破碎組織塊可能還含有液體，可以在一個無菌培養(yǎng)皿底沾幾下，把液體）；種植完成后，可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時，然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜（也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜）；
（7）培養(yǎng)基培養(yǎng)：將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基，然后在恒溫潮濕細胞培養(yǎng)箱（37℃，5% CO2）培養(yǎng)48h后觀察單個細胞從組織塊中爬出情況，一般3-5 day能夠達到傳代的爬出效率；
（8）貼壁細胞傳代：當單個細胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍，進行傳代，此時可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細胞，消化時間根據(jù)正常細胞消化時間即可，當然可以在消化過程中不斷管擦爬出細胞的皺縮情況，一旦達到消化完成（皺縮細胞≥70%）即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個細胞時候，一定要輕柔/緩慢，不能吹打到組織塊，如果組織塊掉下來，大概率是不會再貼壁成功啦。根據(jù)細胞數(shù)量種植到對應的培養(yǎng)皿/瓶中；
（9）鑒定：細胞在傳代至代、第五代、第十代時候可以將部分細胞進行鑒定，鑒定辦法包括：RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細胞術(shù)等。實驗方法:
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法（物理裂解）和消化分離法。其中，機械分散法的特點是簡便、快速，但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差，適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。
公司正在出售的產(chǎn)品：
植物磷脂酶D1（Phospholipase D1）活性熒光定量檢測試劑盒
組織尿酸含量直接（TPTZ）比色法定量檢測試劑盒
人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)elisa檢測試劑盒
大鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)elisa檢測試劑盒
小鼠磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(pERK)elisa檢測試劑盒免費代測
細胞CASPASE-4蛋白表達熒光定量檢測試劑盒
γ-谷氨酰半胱氨酸連接酶GCL測試盒 50T/48樣 比色法
細胞膜電位檢測試劑盒100T
小鼠核轉(zhuǎn)錄因子－1（AP－1）elisa檢測試劑盒
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號轉(zhuǎn)導蛋白2抗體 ERN2
配對盒基因2抗體 PAX2
GalNAc-T7蛋白抗體 GALNT7
G蛋白結(jié)合蛋白4抗體 GBP4
胰高血糖素樣肽-1受體/GLP-1受體抗體 GLP-1R
異質(zhì)性核糖核蛋白C1/C2抗體 hnRNP C1/C2
多腺苷二磷酸多聚酶PARP10抗體 PARP10
泛素連接酶抗體 PIRH2
褪黑素受體1A/松果體素受體1A抗體 MTNR1A
微小細胞血癥相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子單克隆抗體 MITF
SAPS結(jié)構(gòu)域家族1抗體 SAPS1
SMARCD1抗體 SMARCD1
9號染色體開放閱讀框95抗體 C9orf95/NRK
AF680標記的骨成型蛋白受體1A抗體 BMPR1A, Alexa Fluor 680 conjugated
檢查點蛋白HUS1抗體 HUS1
精子相關(guān)抗原7抗體 SPAG7
小鼠補體C4(C4)elisa檢測試劑盒
人毛囊干細胞包涵體蛋白溶解試劑盒
細胞膜蛋白萃取試劑盒
beta Amyloid(25-35); beta Amyloid 25-35; beta-Amyloid 25-35; Amyloid 25-35; A4; AAA; ABETA; ABPP; AD1; Alzheimers Disease Amyloid Protein; Amyloid B; Amyloid Beta A4 Protein Precursor; Amyloid Beta; Amyloid of Aging and Alzheimer Disease; APP; APPI; B Amyloid; Beta APP; Cerebral Vascular Amyloid Peptide; CTFgamma; CVAP; PN II; PN2; PreA4; Protease nexin II; A beta; A4_HUMAN.
人腦膜細胞
小鼠乳腺上皮細胞
LS174T人結(jié)直腸腺癌細胞
CHL-1人黑素瘤細胞