產(chǎn)品名稱
人心肌細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
心臟組織
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
梭形、多角形
分類
人原代細胞
貨號
A01X1266
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
人心肌細胞分離自心臟組織；心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構成，左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以供應氧和各種營養(yǎng)物質，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等），使細胞維持正常的代謝和功能。心肌細胞呈菱形、多邊形等不規(guī)則形狀；細胞培養(yǎng)2h后開始貼壁，呈梭形；到12h左右，細胞開始伸出偽足，呈菱形、多角形；細胞分離培養(yǎng)48h以后，大部分伸出偽足、呈巴掌狀，部分心肌細胞會出現(xiàn)搏動；心肌細胞為終末分化細胞，在體外不增殖。體外培養(yǎng)的心肌細胞可保持結構及功能上的某些特點，并具有自發(fā)性節(jié)律搏動，且心肌細胞的培養(yǎng)具有簡便、定量、重復性好以及不受神經(jīng)體液因素的影響等特點。利用培養(yǎng)的心肌細胞在探索非血液動力學因素所致的心肌肥厚的調節(jié)，研究心肌細胞的生物力學、凋亡、受體下調、缺血預處理、信號通路、對作用于心臟的新藥進行篩選并對其性進行評價以及從培養(yǎng)的心肌細胞中提取有價值的生物因子等方面具有廣闊的應用前景，對于研究其生理功能、作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介：
公司實驗室分離的人心肌細胞采用膠原酶-胰酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法，并用化學試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的人心肌細胞經(jīng)α-Sarcometric actin熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除，然后將肝組織反復剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠可溶性Toll樣受體4(sTLR4)elisa檢測試劑盒
小鼠ATP結合盒轉運蛋白A1(ABCA1)elisa檢測試劑盒
植物總RNA純化試劑盒（高多糖/酚）
純化線粒體ATP生物發(fā)光法定量檢測試劑盒
含L谷氨酰胺，不含丙酮酸鈉 500ml
大鼠凝血酶原片段F1+2(F1+2)elisa檢測試劑盒
冰凍切片組織衰老特異性脂褐素尼羅籃原位染色試劑盒
兔補體蛋白3(C3)elisa檢測試劑盒免費代測
（folic acid）含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒
溶質載體家族17成員5抗體 SLC17A5
乳腺癌易感基因2單克隆抗體 BRCA2
KLK3單克隆抗體
MANEL蛋白抗體 MANEL
中腦核仁蛋白抗體 Midnolin
腫瘤抑素抗體 COL4A3/Tumstatin
干擾素α16抗體 IFNA16/Interferon alpha 16
孤獨癥易感基因2蛋白抗體（自閉癥相關蛋白1） AUTS2
纖維連接蛋白/Ugl-Y3抗體 Fibronectin/Ugl-Y3
線粒體內(nèi)膜轉位酶8B TIMM8B
γ-分泌酶組件蛋白NCLN抗體 Nicalin
白介素17F抗體 IL-17F
Brachyury蛋白單克隆抗體 TBXT
CD36抗體 CD36
離子通道蛋白Kv3.3抗體 KCNC3
磷酸化叉頭蛋白3A抗體 Phospho-FoxO3a (Ser318 + Ser321)
大鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)elisa檢測試劑盒
人心肌細胞豬促甲狀腺素釋放(TRH)elisa分析檢測試劑盒
人甲酰甲硫氨酸(fMet)elisa分析檢測試劑盒
Carcinoembryonic antigen; Carcinoembryonic antigen related cell adhesion molecule 5; Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 5; CD66e; CD66e antigen; CEACAM5; CEAM5_HUMAN; DKFZp781M2392; Meconium antigen 100.
人心臟微血管內(nèi)皮細胞
小鼠卵巢間質細胞
NCI-H157人非小細胞肺腺癌細胞
CT26小鼠結腸癌細胞