
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠輸尿管成纖維細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
輸尿管組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
長梭形細胞
分類
大鼠原代細胞
貨號
A01X1602
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1) 組織來源于實驗動物的正常輸尿管組織。
2) 細胞鑒定:波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細胞生長方式:長梭形細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 delf原代 上皮 細胞培養(yǎng)體系 作為該細胞的培養(yǎng)試劑。
細胞簡介:
輸尿管位于腹膜后,為一肌肉粘膜所組成管狀結(jié)構(gòu),上起自腎盂,下終止于膀胱三角。輸尿管管壁分為 4層:黏膜表面、固有層、輸尿管肌層和外膜。其中,外膜主要由成纖維細胞組成。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠組蛋白H2B(H2B)elisa檢測試劑盒
大鼠甲狀腺素抗體(TAb)elisa檢測試劑盒
魚過氧化氫酶(CAT)elisa分析檢測試劑盒
人肥大細胞類胰蛋白酶(MCT)elisa分析檢測試劑盒
/酵母細胞β-半乳糖苷酶活性化學發(fā)光法
小鼠波形蛋白(VIM)elisa檢測試劑盒
甘肽(氧化型)(Glutathione;GSSH)
過氧亞硝基陰離子劑硫化乙醇胍琥珀酸鈉
硫氧還蛋白氧化還原酶(TrxR)測試盒
胰羧肽酶E抗體 Carboxypeptidase H
抑癌蛋白DLP1抗體 PDSS2
多效生長因子抗體 PTN
泛素特異性蛋白酶28抗體 USP28
gamma氨基丁酸B型受體1抗體 GABABR1
G蛋白結(jié)合蛋白α16/Gα16抗體 G protein alpha 16
鉬輔因子合成蛋白1抗體 MOCS1
內(nèi)皮素B受體抗體 Endothelin B Receptor
Ⅱ型膠原蛋白抗體 Collagen II
AF680標記的基質(zhì)金屬蛋白酶13抗體 MMP13, Alexa Fluor 680 conjugated
減數(shù)分裂誘導蛋白IME1抗體 IME1
金屬蛋白酶組織抑制因子-2單克隆抗體 TIMP-2
SARS冠狀病毒2 N蛋白小鼠單克隆抗體 SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Nucleocapsid
SMU1蛋白抗體 SMU1
調(diào)控周期蛋白依賴蛋白激酶SEI2抗體 SERTAD2
晚期包膜蛋白2B抗體 LCE2B
細胞SPHK2激酶活性熒光定量檢測試劑盒
大鼠輸尿管成纖維細胞Mouse Anti-Human IgM / PE-Cy5
FBXL18蛋白抗體
Caspase 3 precursor; APOPAIN; CASP3; Caspase 3 apoptosis related cysteine protease; Caspase3; CPP32; CPP32B; Cysteine protease CPP32; Human cysteine protease CPP32 isoform alpha mRNA complete cds; PARP cleavage protease; SCA 1; SCA1; SREBP cleavage activity 1; Yama; CASP3_HUMAN; Caspase-3; CASP-3; Apopain; Protein Yama; SREBP cleavage activity 1; SCA-1.
大鼠輸尿管成纖維細胞
人脂肪干細胞
MCF-7+luc人乳腺癌細胞熒光素酶標記
MES-SA人癌細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。