細(xì)胞簡介：
脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞構(gòu)成，聚集成團(tuán)的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉。脂肪組織中的網(wǎng)狀纖維很發(fā)達(dá)。
微血管內(nèi)皮細(xì)胞受損已被視為創(chuàng)傷、感染、休克、腫瘤、血管等多種和綜合癥發(fā)展的病理基礎(chǔ)。一旦微血管內(nèi)皮細(xì)胞受損，必然影響甚至破壞微血管內(nèi)皮細(xì)胞正常的生物學(xué)功能，引起多種的發(fā)生。微血管內(nèi)皮細(xì)胞間連接與血管通透性有著非常密切的關(guān)系。微血管內(nèi)皮細(xì)胞合成與分泌前列環(huán)素、一氧化氮、內(nèi)皮源性超極化因子和內(nèi)皮素等物質(zhì)，來維持血管的正常狀態(tài)。
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組織來源 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
貨號 |
用途 |
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脂肪組織 |
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
A01X1403 |
僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞特性：
1）細(xì)胞來源于人正常脂肪組織。
2)細(xì)胞鑒定：血管假性血友病因子（vWF）熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，多角形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)具體步驟：
（1）動物福利：小鼠麻醉犧牲/處死，或者斷頸處死；
（2）小鼠：可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者簡單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min，然后轉(zhuǎn)移至無菌操作臺使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈；
（3）取出心臟組織：用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔，取出心臟組織，置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中；
（4）組織：在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二，充分洗滌里邊的血液，/3次，每次5min；
（5）破碎組織：使用眼科鉗或者剪刀，將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊；（備注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min，
利于后期細(xì)胞從組織塊中爬出來，同時能夠消除部分結(jié)締組織等）
（6）種植組織塊：將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次，每次5min，然后使用完全培養(yǎng)基（含有1X雙抗）洗滌一次。經(jīng)過的心臟破碎組織塊經(jīng)過離心后，可以用細(xì)頭
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中（備注：破碎組織塊可能還含有液體，可以在一個無菌培養(yǎng)皿底沾幾下，把液體）；種植完成后，可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時，然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜（也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜）；
（7）培養(yǎng)基培養(yǎng)：將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基，然后在恒溫潮濕細(xì)胞培養(yǎng)箱（37℃，5% CO2）培養(yǎng)48h后觀察單個細(xì)胞從組織塊中爬出情況，一般3-5 day能夠達(dá)到傳代的爬出效率；
（8）貼壁細(xì)胞傳代：當(dāng)單個細(xì)胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍，進(jìn)行傳代，此時可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細(xì)胞，消化時間根據(jù)正常細(xì)胞消化時間即可，當(dāng)然可以在消化過程中不斷管擦爬出細(xì)胞的皺縮情況，一旦達(dá)到消化完成（皺縮細(xì)胞≥70%）即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個細(xì)胞時候，一定要輕柔/緩慢，不能吹打到組織塊，如果組織塊掉下來，大概率是不會再貼壁成功啦。根據(jù)細(xì)胞數(shù)量種植到對應(yīng)的培養(yǎng)皿/瓶中；
（9）鑒定：細(xì)胞在傳代至代、第五代、第十代時候可以將部分細(xì)胞進(jìn)行鑒定，鑒定辦法包括：RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細(xì)胞術(shù)等。實(shí)驗(yàn)方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法（物理裂解）和消化分離法。其中，機(jī)械分散法的特點(diǎn)是簡便、快速，但對組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差，適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長。
公司正在出售的產(chǎn)品：
動物胸腺組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒
小鼠球蛋白G2(IgG2)elisa檢測試劑盒
大鼠多巴胺D2受體(D2R)elisa檢測試劑盒
/酵母a-（a-AMYLASE）活性比色法定量檢測試劑盒
人單純皰疹病毒Ⅰ型(HSVⅠ)抗體(IgM)elisa檢測試劑盒
細(xì)胞熒光顯微鏡間接檢測試劑盒（含熒光二抗）
尿酸氧化酶elisa檢測試劑盒
BCA 蛋白定量試劑盒1000T
小鼠核因子κB抑制因子α(IκBα)elisa檢測試劑盒
APC標(biāo)記人TNF-α單克隆抗體 human TNF-α/APC
B7-H4抗體 B7H4
跨膜蛋白120A抗體 TMEM120A
蛋白激酶Fyn/步原癌基因抗體 SLK
X染色體開放閱讀框23抗體 CXorf23
β淀粉樣蛋白前體蛋白結(jié)合蛋白1抗體 APPBP1
細(xì)胞凋亡增強(qiáng)核酸酶抗體 AEN
細(xì)胞角蛋白84抗體 KRT84
Kelch樣蛋白14抗體 KLHL14
LENG8蛋白抗體 LENG8
驅(qū)動蛋白家族蛋白3抗體 KIF3A
熱休克蛋白71抗體 Hsc70
甘氨酰胺核苷酸合成酶重組兔單克隆抗體 GART
干擾素誘導(dǎo)蛋白激酶PACT抗體 PACT(PKR activating protein)/PRKRA
早老素蛋白1+2抗體 Presenilin 1 + 2
腫瘤錯配修復(fù)基因PMS2抗體 PMS2
牛維生素D(VD)elisa分析檢測試劑盒
人脂肪微血管內(nèi)皮細(xì)胞LXRβ ELISA Kit
豚鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)elisa分析檢測試劑盒
Family with sequence similarity 80, member A; MGC47816; Ribosomal protein S6 modification like protein A; RIMKLA; RIMKA_HUMAN.
人脂肪微血管內(nèi)皮細(xì)胞
人肝星狀細(xì)胞
NCI-H520人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
QGY-7701人肝癌細(xì)胞