培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
豬頸動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
頸動(dòng)脈組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
長梭形細(xì)胞
分類
豬原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X2258
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常頸動(dòng)脈組織。
2)細(xì)胞鑒定：平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式：長梭形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代 平滑肌 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介：
頸動(dòng)脈存在于脊椎動(dòng)物頸部的動(dòng)脈。有頸外動(dòng)脈和頸內(nèi)動(dòng)脈，前者分布至頭頂部和顏面部，后者進(jìn)入顱內(nèi)分布至腦和眼眶內(nèi)。血管發(fā)生一個(gè)主要因素是由于血管平滑肌細(xì)胞轉(zhuǎn)變成為了具有繁殖能力的表型。因此，對(duì)動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)和研究可用來發(fā)現(xiàn)和確定新的血管的靶向方法。
公司正在出售的產(chǎn)品：
載玻片細(xì)胞CASPASE-10蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
活性氧檢測(cè)試劑盒DCFHDA200T
大鼠球蛋白E(IgE)elisa檢測(cè)試劑盒
酵母5-羥色胺-N-乙?；D(zhuǎn)移酶（Serotonin N-Acetyltransferase）活性
土壤β-葡萄糖苷酶（β - GC）測(cè)試盒
鈣結(jié)合線粒體載體蛋白抗體 Anti-SLC25A12/ARALAR
受體相互作用蛋白激酶1抗體 Anti-RIP1/RalBP1
細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子 p52/p100抗體 Anti-NFKB p52
鋅指蛋白ZBTB34抗體 Anti-ZBTB34
纖維母細(xì)胞生長因子3抗體 FGF3
線粒體內(nèi)膜轉(zhuǎn)位源蛋白9抗體 TIMM9
γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16抗體 IFI16
白介素17受體D抗體 IL-17RD
BRD2蛋白重組兔單克隆抗體 BRD2
CD39樣蛋白2/ENTPD6抗體 ENTPD7
離子型谷氨酸受體1重組兔單克隆抗體 NMDAR1
磷酸化CREB-1抗體 phospho-CREB-1 (Ser133)
腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子7抗體 TRAF7
軸突蛋白2抗體 NRXN2
睪丸特異激酶底物蛋白抗體 TSKS
骨形態(tài)發(fā)生蛋白3抗體 BMP3
L-絲氨酸脫氨酶抗體 SDSL
MS4A18蛋白抗體 MS4A18
人瘤病毒16型L2抗體 HPV16 L2
/通透性增加蛋白樣3抗體 BPIL3
人別孕烯醇酮/3α,5α-四氫孕酮(AP/3α,5α-THP)elisa檢測(cè)試劑盒
豬頸動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞小鼠生長釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)elisa檢測(cè)試劑盒
人Rho家族GTP酶1(RND1)elisa檢測(cè)試劑盒
2010013H22Rik; 2210021I22Rik; 2210401J11Rik; 3-galactosyl-O-glycosyl-glycoprotein beta-1; 6-N-acetylglucosaminyltransferase 3; 6-N-acetylglucosaminyltransferase; Beta 1 3 galactosyl O glycosyl glycoprotein beta 1 6 N acetylglucosaminyltransferase 3; Beta-1; Beta1 6 N acetylglucosaminyltransferase 3; beta1 6 N acetylglucosaminyltransferase; C2/4GnT; C24GNT; C2GnT M; C2GnT mucin type; C2GnT-M; C2GnT-mucin type; C2GnT2; C2GNTM; Core 2 beta 1 6 N acetylglucosaminyltransferase II; Core 2/core 4 beta 1 6 N acetylglucosaminyltransferase; Core 2/core 4 beta-1; dI/C2/C4GnT; EC 2.4.1.102; EC 2.4.1.150; GCNT3; GCNT3_HUMAN; Glucosaminyl (N acetyl) transferase 3; Glucosaminyl (N acetyl) transferase 3 mucin type; GnT M; GNTM; hC2GnT M; hC2GnT-M; Mucus-type core 2 beta-1,6-N-acetylglucosaminyltransferase. OTTHUMP00000163601.
豬頸動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
大鼠肝kupffer細(xì)胞
NCI-H1417 [H1417]人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
人脂肪肉瘤細(xì)胞；SW872(ATCC HTB-92)
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。